Leadmium? Green AM dye 鉛離子（鎘離子）綠色熒光探針

訂購信息：

以上產(chǎn)品均為L(cháng)ife（Invitrogen）原裝正品，我司（懋康生物）對A10024進(jìn)行拆開(kāi)銷(xiāo)售，特惠價(jià)為900元/支，單支50μg，現貨銷(xiāo)售，歡迎訂購。

【溫馨提示】：見(jiàn)我司整理的金屬離子【鈣，鉀，鈉，鋅，鎂，氯，鉛離子】熒光染色探針產(chǎn)品專(zhuān)題。

基本介紹：

Leadmium? Green AM dye（鉛離子/鎘離子綠色熒光探針）是Life旗下品牌Molecular Probe的專(zhuān)利產(chǎn)品，是一種獨特的工具用來(lái)高度特異性和高靈敏度的檢測細胞內鉛離子（lead）和鎘（cadmium）水平。當溶液內鉛離子和鎘離子測定的標準實(shí)驗建立后，這一獨特的Leadmium? Green AM探針能特別設計用來(lái)檢測活細胞內這些有毒的環(huán)境污染重金屬。

產(chǎn)品特點(diǎn)

1） 高特異性探針（指示劑）用來(lái)檢測細胞內鉛和鎘水平；

2） 靈活的檢測方式，適用于流式細胞儀、熒光顯微鏡成像和熒光酶標板檢測；

3） 明亮的熒光和高度鑒別鎘離子，能檢測到納摩爾（nM）水平的鉛離子和微摩爾（μM）水平的鎘離子；

4） 檢測方便，只需用488nm激光激發(fā)即可；

5） 探針輕易加載進(jìn)入細胞，進(jìn)入細胞內經(jīng)酯酶水解后能極好的保存在細胞內。

產(chǎn)品保存

一旦收到本品，置于≤-20℃保存。一旦配制，Leadmium? Green AM dye溶液（in DMSO）請在一天內用完。

實(shí)驗前試劑準備

1、需要的材料（自行準備）

生理鹽水（0.85% NaCl）【不能使用PBS】; DMSO（高質(zhì)量，無(wú)水，如Cat#：MS4601-100mL）

2、 其他試劑（自行準備）

PbCl2溶液；CdCl2溶液；TPEN（tetrakis-(2-pyridylmethyl)ethylenediamine）；乙醇；

離子霉素鈣鹽（貨號：MZ2152-1MG）；死細胞染料比如碘化丙啶（Cat#：MX4205-10MG）。

3、 試劑準備

3.1 從冰箱內取出一管Leadmium? Green AM dye（50 μg），讓其回溫到室溫，避光保存。

3.2 往管子內加入50μl 高質(zhì)量無(wú)水的DMSO（Cat#：MS4601-100mL），避光混勻，使其充分溶解。

3.3 用生理鹽水按照1：10的比例將Leadmium? Green AM dye的DMSO儲存液稀釋成工作液（比如取20μl 儲存液加到180μl生理鹽水，混勻），所有溶液制備過(guò)程一直避光。

3.4 37℃溫育生理鹽水，用于后續多個(gè)步驟的清洗過(guò)程。

3.5 【可選】如果此實(shí)驗需要設置相對對照（用已經(jīng)濃度的PbCl2處理細胞），建議PbCl2的起始濃度范圍是1nM-625nM。制備625nM PbCl2【添加250μl 10μM PbCl2到3.75ml生理鹽水。然后做9次連續性梯度稀釋最終得到1nM PbCl2】。37℃保存這些溶液直到需要。每個(gè)濃度需要1ml量。

3.6 【可選】如果此實(shí)驗需要設置相對對照（用已經(jīng)濃度的CdCl2處理細胞），建議CdCl2的起始濃度范圍是1μM-250μM。制備250μM CdCl2【添加1ml 1mM CdCl2到3ml生理鹽水。然后做8次連續性梯度稀釋最終得到1μM CdCl2】。37℃保存這些溶液直到需要。每個(gè)濃度需要1ml量。

3.7 【可選】制備10mM TPEN工作液，通過(guò)添加1.2ml無(wú)水乙醇到5mg TPEN?；靹?，室溫保存。

操作流程【流式分析，具體leadmium Green AM dye Manual】

應用實(shí)例：

Figure 1. Dual-color scatter plot showing two populations. Jurkat cells were loaded with Leadmium? Green AM dye and washed. The sample was then incubated in the presence of 1 μM PbCl2 (in saline) and 1 μM ionomycin. After washing the sample, it was incubated in the presence of PI. Dual-color fluorescence was collected using 488 nm excitation and 525/10 nm and 610/10 nm bandpass filters. This results in visualization of two populations: dead cells (positive for PI) and live cells that contain lead (positive for Leadmium? Green dye and negative for PI).

發(fā)表文獻（A10024）：

Cellular sequestration of cadmium in the hyperaccumulator plant species Sedum alfredii. PubMed ID: 22025609

A new ABC half-transporter in Leishmania major is involved in resistance to antimony.  PubMed ID: 23716044

Increased nuclear thioredoxin-1 potentiates cadmium-induced cytotoxicity. PubMed ID: 22961094

 — —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】

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