FITC-Dextran 70 (FD70) FITC標記葡聚糖（70 kDa）

產(chǎn)品標簽

FITC-Dextran FITC標記葡聚糖；FD40； FD70；TRITC-dextran 羅丹明標記葡聚糖；TD40；TD70；microcirculation 微循環(huán)研究；Cell permeability 細胞滲透性研究；Microfluorimetry 顯微熒光測定法；

產(chǎn)品信息

【變更說(shuō)明】：FITC-Dextran 70 (FD70)自2018.6月開(kāi)始產(chǎn)品貨號由原來(lái)的MS0995變更為MS0905。

產(chǎn)品描述

FITC標記葡聚糖（FITC-Dextran）是以天然葡聚糖B512F限制水解和分級純化制備的不同分子量葡聚糖為底物，經(jīng)熒光素標記所得的合成探針。熒光素基團通過(guò)一個(gè)穩定的硫代氨甲酰鍵連接到葡聚糖上（見(jiàn)附錄圖1. FITC-Dextran分子片段的結構特征），此標記步驟不會(huì )引起任何的葡聚糖降解。FITC-Dextran內每個(gè)葡萄糖單位含0.002~0.008 mol FITC，這一低水平的替換確保葡聚糖最小的結構變化，這一特性對滲透性研究來(lái)說(shuō)是最基本需求。

FITC標記葡聚糖（FITC-Dextran）廣泛用于微循環(huán)和細胞通透性研究，通過(guò)熒光顯微測定法來(lái)檢測。還可用于植物細胞壁多孔性和毛細血管通透性研究。小分子量的FITC-Dextran也能用來(lái)測定比如內吞和細胞連接通透性的生理過(guò)程。FITC-Dextran 70 (FD70)可能用作一種模式化合物來(lái)開(kāi)發(fā)輸送分子到原生質(zhì)體的方法，或者用來(lái)研究水凝膠和脂質(zhì)體等結構內的藥物釋放過(guò)程。也許還能用在微血管和單細胞層通透性研究。血漿蛋白不會(huì )結合FITC-Dextran。

本品是對平均分子量約70kDa葡聚糖進(jìn)行標記的熒光素衍生物，即異硫氰酸熒光素葡聚糖70（fluorescein isothiocyanate dextran 70, FITC-dextran, FD70），以?xún)龈煞坌问教峁?，易溶于水，最大激發(fā)和發(fā)射波長(cháng)分別為493和518nm。

產(chǎn)品特性

1）   CAS NO：60842-46-8

2）   化學(xué)名：Dextran(3′,6′dihydroxy-3-oxospiro(isobenzofuran-1(3H),9′-[9H]xanthen]-5(or 6)-yl)carbamothioate

, average Mw of approximately 70,000

3）   同義名：Fluorescein isothiocyanate-dextran 70; Fluoresceinyl thiocarbamoyl-dextran 70;

4）   分子量：average Mw 59,000-77,000

5）   置換率：0.002~0.008 mol FITC/glucose unit

6）   外觀(guān)：黃色至深橘色粉末

7）   溶解性：易溶于水或鹽溶液，也溶于DMSO，甲酰胺和某些其他極性有機溶劑，不溶于更低的脂肪醇、丙酮、氯仿和二甲基甲酰胺（DMF）

8）   光譜特性：Ex/Em=493/518nm【由于熒光素基團的電荷狀態(tài)依賴(lài)于緩沖液的pH和離子強度，因此熒光強度也會(huì )因這些參數的變化而變化。pH＞8觀(guān)察到最大熒光強度。生理緩沖液能顯著(zhù)影響熒光強度，或得到增加或受到抑制。見(jiàn)附錄圖2. pH 4-9范圍內FITC-Dextran 70的熒光變化（Em=520nm）】

保存與運輸方法

保存：室溫避光短期保存，2-8℃避光長(cháng)期保存，保持密封干燥，至少3年穩定。

運輸：室溫運輸。

產(chǎn)品穩定性

綜合各種溶液體系和溫度下FITC-Dextrans的穩定性測定，總的來(lái)說(shuō)，體內外FITC-Dextrans的穩定性非常優(yōu)秀。僅當pH＞9和上升溫度內熒光素可能存在水解的風(fēng)險。兔血漿、肌肉勻漿液、肝臟勻漿液和尿液內的FITC-Dextrans在37℃，至少3天內保持穩定，分子量不會(huì )發(fā)生變化，且未發(fā)現熒光素基團的釋放。6%三氯乙酸內FITC-Dextrans室溫穩定保存3天。【文獻來(lái)源：P. Kurtzhals, C. Larsen and M. Johansen, High performance size-exclusion chromatographic procedure for the determination of fluoresceinyl isothiocyanate dextrans of various molecular masses in biological media. J Chromatogr, 491(1989), 117-127.】

硫代氨甲酰鍵的水解產(chǎn)生4-或5-氨基熒光素，能立即被HPLC定量檢測到。未發(fā)表的研究數據顯示，將高壓處理的FITC-Dextran 70溶液置于8-50℃長(cháng)達5個(gè)月，發(fā)現僅在50℃情況下可能觀(guān)察到微量（1%）的自由氨基熒光素含量增加。單獨進(jìn)行高壓處理會(huì )引起2.7%的自由氨基熒光素產(chǎn)生。

其他的未發(fā)表研究顯示，FITC-Dextran在pH4溶液35℃內能穩定保存高達1年。而在pH4，80℃內硫代氨甲酰鍵穩定30min，可能觀(guān)察到葡聚糖的降解。pH9，35℃內存放一個(gè)月以上會(huì )發(fā)生一定量（24%）的熒光衰減。

一些研究證明，FITC-Dextrans在持續性實(shí)驗（1-6天）的體內穩定性?！疚墨I來(lái)源：N. Thorball, FITC-dextran tracers in microcirculatory and permeability studies using combined fluorescence Stereo Microscopy, Fluorescence Stereo-microscopy and electron microscopy, Histochemistry, 71(1981), 209-233.】

注意事項

1）  FITC-Dextrans易溶于水或鹽溶液，可根據實(shí)際使用濃度配制適當濃度的母液。

2）  FITC-Dextrans溶液高壓滅菌可能導致少量氨基熒光素的釋放，若需要無(wú)菌，建議用過(guò)濾的方法來(lái)除菌。

3）  為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗服并戴一次性手套操作。

附錄

圖1. FITC-Dextran分子片段的結構特征

圖2. pH 4-9范圍內FITC-Dextran 70的熒光變化（Em=520nm）

 參考文獻

[1]Tang, X., Yan, K., Wang, Y. et al. Activation of PPAR-β/δ Attenuates Brain Injury by Suppressing Inflammation and Apoptosis in a Collagenase-Induced Intracerebral Hemorrhage Mouse Model. Neurochem Res 45, 837–850 (2020). https://doi.org/10.1007/s11064-020-02956-w 

[2]BBB permeability was also evaluated using 70 kDa FITC-dextran. Mice (n?=?5/group) were injected with 70 kDa FITC-dextran (MS0905; MKbio, Shanghai, China) in PBS at 50 mg/kg into the tail vein. Animals were perfused with pre-chilled PBS 15 min after the dextran injection. Following perfusion, the brain tissue was removed, homogenized with 20% trichloroacetic acid, and centrifuged at 12,000 rpm for 10 min. The supernatant was isolated, and relative fluorescence was measured at excitation and emission wavelengths of 493 and 520 nm. The results were calculated using FITC-dextran as the standard, and the values are expressed as ng/g brain tissue.

— —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】

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