單線(xiàn)態(tài)氧熒光探針 Singlet Oxygen Sensor Green（SOSG）

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產(chǎn)品關(guān)鍵詞：

Singlet Oxygen Sensor Green®, SOSG；單線(xiàn)態(tài)氧（Singlet Oxygen,1O2）；單線(xiàn)態(tài)氧熒光探針；S36002；Thermo Fisher; ROS（Reactive oxygen species）活性氧物質(zhì)；

活性氧引起的許多生理?yè)p傷都可能歸因于單線(xiàn)態(tài)氧（1O2），包括與脫氧鳥(niǎo)苷選擇性反應形成8-羥基脫氧鳥(niǎo)苷（8-OHdG）的核酸修飾。單線(xiàn)態(tài)氧的壽命足夠長(cháng)（水中有4.4μs）使其能夠充分擴散進(jìn)入細胞和組織。實(shí)驗室中通常用三種之一的方法來(lái)生成單線(xiàn)態(tài)氧：1）使用感光染料對二氧（3O2）進(jìn)行光化學(xué)反應來(lái)制備；2）通過(guò)對一種過(guò)氧化物或二氧環(huán)丁烷進(jìn)行加熱分解制備；3）氧氣流內通過(guò)微波放電來(lái)制備；單線(xiàn)態(tài)氧通過(guò)在1270nm處具弱化學(xué)發(fā)光的典型特征直接被檢測。

Thermo fisher（molecular probe）公司開(kāi)發(fā)的Singlet Oxygen Sensor Green®, SOSG是目前商業(yè)化可得且應用最廣泛的單線(xiàn)態(tài)氧熒光探針，從材料學(xué)到藥物學(xué)領(lǐng)域，比如光動(dòng)力學(xué)療法。

【特異性強】

Singlet Oxygen Sensor Green®, SOSG高度選擇性結合單線(xiàn)態(tài)氧（1O2）。不像其他的熒光和化學(xué)發(fā)光的單線(xiàn)態(tài)氧檢測試劑，SOSG與其他活性氧物質(zhì)（ROS），包括羥基自由基（·OH）、超氧陰離子（·O2–）和一氧化氮（NO）無(wú)可見(jiàn)反應【見(jiàn)圖1】。

圖1、Singlet Oxygen Sensor Green (SOSG)的熒光反應和對單線(xiàn)態(tài)氧（1O2）的特異性。A）用熒光光度計（Ex/Em= 488/525nm）測定溶液內的熒光，溶液內含SOSG（1 μM ）和亞甲基藍（10 μM）溶于100mM pH 7.5 Tris Buffer; 單線(xiàn)態(tài)氧清除劑疊氮鈉（NaN3，1 mM）；或50% D2O（重水，能夠延長(cháng)1O2的壽命）。每20s完成一次熒光測定，每次測定間隔30s（如灰條標示）。在這30s的間隔中，樣本暴露于激光輻射（630–680 nm，<5 mW），導致亞甲基藍光敏生成1O2。B）用熒光光度計（Ex/Em=488/525nm）測定溶液內的熒光，溶液為50mM pH 7 Tris buffer，1mM 黃嘌呤，SOSG（1 μM ），或含SOSG（1 μM ），或含二氫羅丹明123。約20s之后，加入50 mU/mL黃嘌呤氧化酶（XO）。XO催化黃嘌呤的氧化，產(chǎn)生尿酸和超氧化物。超氧化物瞬間被H2O2降解。

【熒光特征】

Singlet Oxygen Sensor Green®, SOSG與單線(xiàn)態(tài)氧（1O2）反應前，探針最初發(fā)弱藍色熒光，激發(fā)峰在372nm和393nm，發(fā)射峰在395nm和416nm。當含單線(xiàn)態(tài)氧（1O2），探針發(fā)射綠色熒光，光譜特征類(lèi)似于熒光素（最大激發(fā)/發(fā)射波長(cháng)約504/525nm）。

【線(xiàn)性化關(guān)系】

研究發(fā)現Singlet Oxygen Sensor Green®, SOSG的熒光產(chǎn)物在某些溶液中隨著(zhù)時(shí)間被降解，且在不含單線(xiàn)態(tài)氧的堿性pH溶液中，Singlet Oxygen Sensor Green®, SOSG會(huì )發(fā)熒光。不過(guò)，當進(jìn)行適當的操作，綠色熒光信號的強度與單線(xiàn)態(tài)氧（1O2）含量相關(guān)，且不會(huì )受其他ROS的明顯干擾。

【應用】

Singlet Oxygen Sensor Green®, SOSG證實(shí)能用來(lái)檢測溶液和植物組織中的單線(xiàn)態(tài)氧（1O2）。

【使用方法】

1.       SOSG儲存液制備：收到貨按照≤-20℃避光干燥保存。用甲醇來(lái)制備儲存液，每100μg粉末加入33μl甲醇制備~5mM儲存液。正式實(shí)驗前制備工作液，不能用完的工作液需丟棄，不可保存后再用。

2.       溶液檢測：SOSG不具細胞膜滲透性，設計用來(lái)檢測溶液環(huán)境內的單線(xiàn)態(tài)氧。最佳的稀釋緩沖液和工作濃度需根據經(jīng)驗來(lái)調整。建議起始工作濃度為1-10μM。

【爭議點(diǎn)】

Singlet Oxygen Sensor Green®, SOSG不具有細胞膜滲透性，能用于細胞單線(xiàn)態(tài)氧（1O2）檢測？

專(zhuān)利持有方thermo（molecular probe）官方說(shuō)明此探針不具有細胞膜滲透性，適用于溶液體系單線(xiàn)態(tài)氧（1O2）檢測。然而，Gollmer A et al.報道SOSG能插入活哺乳動(dòng)物細胞（文獻來(lái)源：Gollmer A et al. Singlet Oxygen Sensor Green®: photochemical behavior in solution and in a mammalian cell. Photochem Photobiol. 2011 May-Jun;87(3):671-9.）。

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【溫馨提示】：見(jiàn)我司懋康生物整理的活性氧檢測探針專(zhuān)題（Probes for reactive oxygen species）。

相關(guān)產(chǎn)品：ROS研究常用的配套產(chǎn)品，需要了解更多信息歡迎來(lái)電咨詢(xún)，021-54736159，QQ:2971634497。網(wǎng)址：www.maokangbio.com

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